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　　中央空調(diào)保養(yǎng)廠帶您了解冷凍保護劑，Nakanishi以10二甲基亞砜為冷凍保護劑，并采用雙腔生物冷凍管緩慢降溫（降溫速率大約10CP分），-800e冰箱中保存氣管長達3個月仍保持一定的活性。而超過6個月的標(biāo)本氣管結(jié)構(gòu)嚴(yán)重破壞，移植后難以成活。因此，他認(rèn)為使用雙腔生物冷凍管，-800e冰箱保存氣管的最長允許時間為3個月。
　　保存溫度高于-1300e會因細(xì)胞內(nèi)重結(jié)晶導(dǎo)致細(xì)胞膜的破壞，而程控降溫可以更有效的控制降溫速度，因此Nakanish推測程控降溫，液氮保存氣管的時間應(yīng)該更長。本實驗合用二甲基亞砜和海藻糖作為冷凍保護劑，程控降溫，液氮保存的氣管在8個月時仍保持了完整的結(jié)構(gòu)，與冷凍1小時相比活性僅有微小的變化。
　　在另外的實驗中，抽沙管我們用該方法保存6周的氣管經(jīng)同種異體移植后完全成活，與自體移植組無明顯差別。臨床應(yīng)用時當(dāng)然希望有活性氣管的保存時間越長越好，并且也需要明確這個最長的時限，因此這個期限將是我們下一步研究的課題。
　　冷凍速凍冷庫前將氣管標(biāo)本在-40e冷凍保護劑中浸泡4小時，可以使冷凍保護劑充分浸潤氣管軟骨，提高其存活率。我們在實驗中也采用了Kawabe的方法。但冷凍保護劑均有一定的毒性，常溫接觸時間越長對細(xì)胞產(chǎn)生的毒害作用越大。在本實驗中雖沒有對此進行比較研究，但實驗結(jié)果顯示DTF組標(biāo)本有相當(dāng)?shù)拇婊盥?，從而證明Kawabe的方法是有效和可行的。
　　DTF組標(biāo)本在復(fù)溫后雖然有相當(dāng)?shù)拇婊盥?，但還是有個別軟骨細(xì)胞發(fā)生空泡變性。其原因究竟是是冷凍保護劑對細(xì)胞的毒性作用，還是冷凍保護劑沒有完全滲透入所有軟骨細(xì)胞，亦或是冷凍造成的損傷，有待進一步探討。